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擴散法藥敏試驗(Kirby-Bauer法）
Disc difusion method
本試驗為臨床常用的定性試驗，結果報告為敏感、中介（或中）和耐藥，可作為用藥參考。但在應用時應考慮以下因素和注意事項。
1.正確選擇藥敏試驗指征：
（1）屬于引起感染的致病菌，引起低免疫功能患者感染的條件致病菌，若屬于正常菌群的污染菌或與感染無關的細菌無驗意義，如尿中培養出數量上無意義的細菌時、收集不合格的吸道標本中檢出少量非正常菌群成員細菌時等。
（2）用喹喏酮類或鏈霉素治療過程中，菌株易獲得耐藥性須間隔重復作藥敏試驗。
（3）腸杆菌科、假單胞菌、非發酵菌、金黃色葡萄球菌、引起臨床感染的表皮葡萄球菌、流感嗜血杆菌、治療失敗的淋病奈瑟菌等均需作藥敏試驗。
（4）由沙門菌（除傷寒、副傷寒沙門菌外）引起的無并發症的腸道感染，一般不作常規藥敏試驗，臨床通常亦無必要使用抗菌治療。
（5）對需要特殊營養條件和在K－B法規定的培養基上生長速率明顯不一致或需特殊環境培養的細菌，采用本方法時，實驗結果往往不准確，如L型菌、厭氧菌等，不應使用本試驗。
2．正確選擇抗菌藥物種類：應按不同類細菌和不同感染部位選擇抗菌藥物。
3．對于耐甲氧西林葡萄球菌（MRS），因其存在不均一性耐藥，常不能被顯現而誤認作敏感株，應注意識別。尤其應意的是一旦確認為MRS感染，藥敏試驗結果無論對β-內酰胺類抗生素是否敏感，臨床上也不應使用。實驗室不應報告此敏感結果。
4．在標准條件下的藥敏試驗結果，應可作為臨床選擇用藥的參考，但體外試驗結果敏感不一定意味著人體應用一定有效，如為腎衰患者、深部膿腫、血腦屏障、機體某些部位低藥濃度時
5．若試驗結果為“中敏”，如有其他敏感藥物可選擇，用藥時應盡量避免選擇“中敏”藥物。
【正常參考值】
抗生素合理應用是提高抗菌藥物療效、控制細菌耐藥性發生和院內感染增多的重要措施。
【異常結果分析】
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藥物
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腸杆菌科
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銅綠假單胞菌和不動杆菌
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葡萄球菌
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腸球菌
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鏈球菌(非腸球菌)
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嗜血杆菌
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A組首選藥
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氨苄青霉素 |
美洛霉素 替卡西
林/棒酸 |
青霉素G |
青霉素G或氨苄青霉素
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青霉素G
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氨苄青霉素 |
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先鋒V號 先鋒I號 |
慶大霉素 |
苯唑青霉素或甲氧苯青霉素
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TMP/磺 胺異惡唑 |
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慶大霉素
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頭孢他啶
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先鋒V號或先鋒I號
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B組二線藥
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美洛霉素或氧哌嗪青霉素、羧 吩青霉素
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氧哌嗪 青霉素 |
羥氨苄青霉素/棒酸或氨苄青霉素/舒巴坦
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萬古 霉素 |
先鋒 I號 |
羥氨苄青霉素/棒酸或氨苄青霉素/舒巴坦
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羥氨苄青霉素/棒酸氨 青霉素/舒巴坦羧噻吩青霉素/棒酸
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頭孢哌酮/舒巴坦氨曲南
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萬古霉素
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克拉霉素
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氯林可霉素
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萬古霉素
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勞拉霉素
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西力欣
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頭孢美唑 先鋒必素
頭孢替坦
頭孢西丁 |
伊米配能 |
克拉霉素 或紅霉素
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萬古 霉素 |
氯霉素
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凱福隆或復達欣或菌必治
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頭孢羥唑或 頭孢尼西
那西力欣 |
丁胺卡 那霉素
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TMP/磺胺異惡唑
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氯林可霉素
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丁胺卡那霉素
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妥布霉素
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克拉霉素紅霉素
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氯霉素
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環丙氟派酸
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四環素
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TMP/磺胺 異惡唑 |
環丙氟派酸
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C組二線藥選擇報告
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復達欣 氨曲南 |
凱福隆或菌必治
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凱福隆或菌必治
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慶大霉素(僅用于篩選高度耐藥)
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凱福隆或菌必治
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頭孢羥唑 頭孢尼西那 |
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乙基西梭霉素
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伊米配能
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卡那霉素
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氯霉素
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慶大霉素
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四環素
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伊米配能
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乙基西梭霉素
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TMP/磺胺異惡唑
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環丙氟派酸或氧氟沙星
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鏈霉素(僅用于篩選高度耐藥)
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氨曲南
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氧氟沙星
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妥布霉素
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氯霉素
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四環素
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利福平
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氧氟沙星
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環丙氟派酸或氧氟沙星
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氯霉素
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四環素
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利福平
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D組僅尿路感染選用
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羧苄青霉素
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羧苄青霉素
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諾氟沙星
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環丙氟派酸或諾氟沙星
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諾氟沙星
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新惡酸 諾氟沙星或
氧氟沙星 |
頭孢他啶
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喃妥因
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喃妥因
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南妥因
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勞拉頭孢
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喃妥因
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四環素
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磺胺異惡唑
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四環素
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磺胺異惡唑
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諾氟沙星或氧氟沙星
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甲氧苄氨嘧啶
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甲氧苄氨啶
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磺胺異惡唑
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血液（體液）抗菌藥物濃度測定
Deterimination of antibiotic levels in serum and body fluids
在抗生素進入體內達到峰值時采血
【正常參考值】
血液（體液）抗菌藥物濃度
【異常結果分析】
抗菌藥進入體內后由于各種原因的影響，使血液和體液中的濃度變化很大，為能准確的掌握投藥劑量、方法和時間，對部分用藥患者須進行藥物濃度測定。以下為測定的適應范圍。
1．治療濃度與中毒濃度十分接近的抗生素。如慶大霉素、卡那霉素等氨基甙類抗生素。
2．心、肝、腎功能受損者，常規用藥量可能導致中毒。
3．須加大用藥劑量，而又避免中毒的患者。
4．選擇最佳給藥間隔時間。尤其對于無明確參考資料說明的新藥，應于用藥后0．5、1、2、4、6h分別測定。
血清殺菌水平測定
Deterimination of serum bactericidal level
于患者使用抗菌藥物后血藥濃度峰值和低值時抽血分離血清，不能即時測定時，應于-20攝氏度保存。如病原菌為革蘭氏陰性菌，測定前應將血清于56攝氏度30min滅活。
【正常參考值】
能殺滅99．9％接種菌的最高血清稀釋度即為某患者對自身病原菌的血清殺菌水平。
【異常結果分析】
在對某些細菌性感染治療時，尤其對葡萄球菌和腸球菌，常使用慶大霉素等藥物治療，為控制其血藥濃度不致中毒或藥量不足。血清滴度≧1：8時表示治療有效﹔葡萄球菌心內膜炎要求1:32為有效。
β- 內酰胺酶測定
β -Lactamase test
按常規收集細菌學檢驗標本，分離出病原菌，獲得純菌落
細菌產生的β-內酰胺酶可裂解青霉素類和頭孢菌素類抗生素的基本結構β-內酰 胺
酶環，使其喪失活性，大部分金黃色葡萄球菌、部分流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、革蘭氏陰性厭氧菌和少數肺炎鏈球菌能產生β-內酰 胺
酶對青霉素類抗生素及頭孢菌素耐藥。本法可快速獲得結果，指導臨床用藥。凡已產生此 的細菌可及時改用其他抗菌藥物。
【正常參考值】
本法可快速獲得結果，指導臨床用藥。凡已產生此 的細菌可及時改用其他抗菌藥物。
【異常結果分析】
細菌產生的β-內酰胺酶可裂解青霉素類和頭孢菌素類抗生素的基本結構β-內酰胺酶環，使其喪失活性，大部分金黃色葡萄球菌、部分流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、革蘭氏陰性厭氧菌和少數肺炎鏈球菌能產生β-內酰胺酶對青霉素類抗生素及頭孢菌素耐藥。
聯合藥敏試驗
Combination of antibiotics susceptibility test
【正常參考值】
作用類型
【異常結果分析】
對于需同時使用兩種以上抗菌藥物的患者，應進行體外聯合藥敏試驗，可能出現以下試驗結果：
1．協同作用：兩種抗菌藥物聯合使用藥效大于同樣濃度的兩種藥物抗菌作用的總和。
2．無關作用：聯合用藥后藥物的活性與單獨一種抗菌藥物作用相同。
3．累加作用：兩種藥物聯合使用后，其活性等于兩種藥物抗菌作用的總和。
4．拮抗作用：兩種藥物聯合使用后的抗菌活性小于單獨一種藥物的抗菌作用。
最低抑菌濃度的測定
Deterimination of minimal inhibitory concentration
MIC
【正常參考值】
體外定量測定能抑制細菌生長的最低藥物濃度
【異常結果分析】
1 ．根據規定的判讀表報告敏感或耐藥。
2 ．判斷某抗菌藥物對某細菌是否敏感，通常以抗菌藥物治療濃度（抗菌藥常用量在血液中的濃度）與該抗菌藥物對細菌MIC的關系而定。若該抗菌藥物的治療濃度大于MIC為敏感，反之為耐藥。通常測定血藥濃度有困難時可通過藥廠提供的資料進行評估。
3 ．抑菌商數（Inhibitory
quotiont，IQ）計算：由于藥物在體液和組織液中的濃度通常只有血濃度的1／2∼1／10，故以MIC小于血濃度定為敏感，常不能准確反映感染部位的細菌對該抗菌藥物的敏感性，因此可用IQ值判斷。用抗菌藥物在局部組織或體液中的濃度（根據實驗室或藥廠提供資料）除以該藥物的MIC。IQ值越大，抑菌效果愈好，反之則愈差。
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